Soạn Dạy
Ngày …. Tháng ….. năm ........ Ngày ………Tháng……..Năm ........

TIẾT 15

THỰC HÀNH
MỘT SỐ THÍ NGHIỆM VỀ ENZIM.

I/ Thí nghiệm với enzim catalaza:
1/ Mục tiêu:
- Giúp học sinh biết bố trí thí nghiệm và tự đánh giá được mức độ ảnh hưởng của nhiệt độ môi trường lên hoạt tính của enzim catalaza
- Tự tiến hành thí nghiệm theo quy trình đã cho trong sgk.
2/ Chuẩn bị:
Mẫu vật: một vài củ khoai tây sống và một vài củ khoai tây đã luộc chín.
Dụng cụ và hoá chất: Dao, ống nhỏ giọt, dung dịch H2O2, nước đá.
3/ Nội dung và cách tiến hành:
- Cắt khoai tây sống và khoai tây chín thành những lát mỏng khoảng 5 mm
- Cho một số lát khoai tây sống vào trong khay đựng nước đá hoặc trong ngăn đá tủ lạnh trước khi thí nghiệm 30 phút.
- Lấy một lát khoai tây sống để ở nhiệt độ phòng thí nghiệm, một lát đã luộc chín và một lát khoai tây sống lấy từ tủ lạnh ra, rồi dùng ống hút nhỏ lên mỗi lát khoai tay một giọt H2O2.
- Quan sát xem có hiện tượng gì xảy ra trên các lát khoai tây và giải thích nguyên nhân tại sao lại có sự khác nhau đó?
4/ Thu hoạch:
Viết tường trình và trả lời một số câu hỏi:
- Tại sao với lát khoai tây sống ở nhiệt độ phòng thí nghiệm và lát khoai tây chín lại có sự khác nhau về lượng khí toả ra?
- Cơ chất của enzim catalaza là gì?
- Sản phẩm tạo thành sau phản ứng do enzim này xúc tác là gì?
- Tại sao có sự khác nhau về hoạt tính enzim giữa các lát khoai tây để ở nhiệt độ phòng và trong tủ lạnh?
II/ Thí nghiệm sử dụng enzim trong quả dứa tươi để tách chiết ADN:
1/ Mục tiêu:
Sau khi làm thí nghiệm, học sinh phải:
- Tự mình tách chiết được ADN ra khỏi tế bào bằng các hoá chất và dụng cụ đơn giản theo quy trình đã cho.
- Rèn luyện các kỹ năng thục hành.
2/ Chuẩn bị:
Mẫu vật: Dứa tươi 1 quả, mỗi nhóm học sinh một buồng gan gà hoặc một mẫu gan lợn.
Dụng cụ, hoá chất:
- Ống nghiệm, Pipet, cốc thuỷ tinh, máy xay sinh tố, chày cối xứ hay dụng cụ khác để nghiền mẫu vật, dao, phiểu, thớt, vải màn hoặc giấy lọc, ống đong, que tre có đường kính 1mm dài 15 cm
- Cồn êtanol 70o – 90o, nước lọc hoặc nước cất lạnh, nước rửa chén.
3/ Cách tiến hành thí nghiệm:
Để tiến hành thí nghiệm tách chiết ADN từ tế bào gan cần thực hiện các bước sau:
Bước 1: Nghiền mẫu vật.
- Trước hết loại bỏ lớp màng bao bọc gan rồi thái nhỏ gan, cho vào cối nghiền hoặc máy xay sinh tố để tách rời và phá vỡ các tế bào gan. Nếu nghiền gan trong máy xay sinh tố thì cần cho vào cốc một lượng nước lạnh gấp đôi lượng tế bào gan. Nếu nghiền bằng chày cối thì sau khi nghiền cho thêm một lượng nước gấp đôi lưọng tế bào gan rồi khuấy đều.
- Sau đó, lọc dịch nghiền qua giấy lọc hoặc vải màn hay giấy lọc để loại bỏ phần xơ lấy dịch lọc
Bước 2: Tách ADN ra khỏi tế bào và nhân tế bào.
- Lấy một lượng dịch lọc cho vào ống nghiệm (chiếm ½ thể tích ống nghiệm), rồi thêm vào dịch nghiềm một lượng nước rửa chén bát với khối lượng bằng 1/6 khối lượng dịch nghiền tế bào. Sau đó, khuấy nhẹ rồi để yên trong vòng 5 - 10 phút trên giá ống nghiệm. Tránh khuấy mạnh làm xuất hiện bọt.
Bước 3: Kết tủa ADN trong dinh dưỡng dung dịch tế bào bằng cồn.
Nghiêng ống nghiệm và rót cồn êtanol 70 – 90o dọc theo thành ống nghiệm một cách cẩn thận sao cho cồn tạo thành một lớp nỗi trên bề mặt dung dịch với một lượng bằng dịch nghiền có trong ống nghiệm.
Để ống nghiệm trên giá trong khoảng 10 phút và quan sát lớp cồn trong ống nghiệm. Chúng ta có thể thấy các sợi ADN kết tủa lơ lửng trong lớp cồn dưới dạng các sợi trắng đục.
Bước 4: Dùng que tre đưa vào trong lớp cồn, khuấy nhẹ cho các phân tử ADN bám vào que tre rồi vớt ra và quan sát. Do các sợi ADN kết tủa dễ gãy nên khi vớt ra khỏi ống nghiệm cần phải nhẹ nhàng.
4/ Thu hoạch:Viết tường trình thí nghiệm và trả lời một số câu hỏi sau:
- Cho nước rửa chén bát vào nước dịch nghiền tế bào nhằm mục đích gì?Giải thích.
-